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NMY51 Strain
NMY51 Strain
規(guī)格:
貨期:
編號:B98233
品牌:Mingzhoubio

標(biāo)準(zhǔn)菌株
定量菌液
DNA
RNA

規(guī)格:
凍干粉
斜面
甘油
平板


產(chǎn)品名稱 NMY51 Strain
商品貨號 B98233
規(guī)格 100μl
儲存 -20℃
基因型 MATahis3Δ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4
基本信息 培養(yǎng)基:YPDA 菌株類別:酵母菌 培養(yǎng)條件:28℃,有氧,YPDA 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化:電轉(zhuǎn) 保存方式:30%甘油,-20℃ 基本應(yīng)用:酵母雙雜交
菌株簡介 DUALmembrane系統(tǒng)是DUALsystems BioTech公司開發(fā)的專門篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測技術(shù),它利用分離的泛素系統(tǒng)(split-ubiquitin)直接檢測天然狀態(tài)下膜蛋白間的相互作用,是目前市面上唯一檢測膜蛋白間相互作用的酵母雙雜系統(tǒng)。此系統(tǒng)采用NMY51酵母菌株,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行蛋白互作驗證或篩庫試驗;此菌株Transformation marker為: trp1, leu2-3,報告基因為:HIS3, ADE2 和 lacZ,第一步通過營養(yǎng)缺陷型報告基因(HIS3, ADE2)進行選擇性生長篩選,進一步通過 LacZ 報告基因進行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選,三個獨立的報告基因,受不同啟動子的調(diào)控,降低假陽性幾率。原理:泛素(ubiquitin)分子量很小,由 76aa 殘基組成;泛素作為降解信號分子,可以連接另外一種蛋白質(zhì)的 N 端,然后被泛素專一性蛋白酶(UBPs)識別,從而導(dǎo)致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分:N 端(Nub),C 端(Cub)。首先,人為地將泛素 Nub 的 3 位異亮氨酸突變?yōu)楦拾彼幔∟ubI 突變?yōu)?NubG)。這樣與 Cub 的親合力大大降低,避免了 Cub 和 Nub 自我結(jié)合或接近的可能性。其次,將Cub 部分與人工合成的 LexA-VP16 轉(zhuǎn)錄激活因子融合成一個融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常條件下 NubG不與Cub 結(jié)合,UBPs 也不能識別分離的泛素,轉(zhuǎn)錄激活因子也不會被切下來。最后,將要檢測的蛋白質(zhì)分別與NubG和Cub融合,形成 bait 融合蛋(bait-cub-LexA -VP16)和 prey 融合蛋白(prey-NubG)。如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用,就會促使 NubG 和 Cub 的相互接近,被 UBPs 識別,導(dǎo)致 LexA-VP16 的解離,進入核內(nèi),從而激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。 此系統(tǒng)可使用四種Bait質(zhì)粒:pBT3-N,pBT3-SUC,pBT3-STE,pBT3-C,篩選標(biāo)志均為LEU;三種Prey質(zhì)粒:pPR3-C ,pPR3-SUC,pPR3-STE,篩選標(biāo)志均為TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),然后使用30%的甘油保藏菌種。
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
周經(jīng)理 17757487661 1296385441
于經(jīng)理 18067160830 2088210172
沈經(jīng)理 19548299266 2662369050
李經(jīng)理 13626845108 972239479
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